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      MycAway? Mycoplasma Real-time qPCR Detection Kit 40618ES05
      MycAway? Mycoplasma Real-time qPCR Detection Kit 40618ES05
      • MycAway? Mycoplasma Real-time qPCR Detection Kit 40618ES05

      MycAway? Mycoplasma Real-time qPCR Detection Kit 40618ES05

      產品報價:595元

      更新時間:2021/9/15 17:30:53

      地:上海

      牌:YEASEN

      號:40618ES05

      廠商性質: 生產型,貿易型,服務型,

      公司名稱: 翌圣生物科技(上海)股份有限公司

      產品關鍵詞: 支原體qPCR檢測   支原體qPCR檢測   支原體qPCR檢測  

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      翌圣生物 : (13916792673) (400-6111-883)

      (聯系我時,請說明是在來寶網上看到的,謝謝?。?/b>


      • 產品信息

        產品名稱

        產品編號

        規格

        價格(元)

        促銷價(元)

        MycAway? Mycoplasma Real-time qPCR Detection Kit  

        支原體qPCR檢測試劑盒(探針法)

        40618ES05

        5 T

        855

        595

        40618ES25

        25 T

        4155

        3155

        40618ES60

        100 T

        13855

        10355


        產品描述

        MycAway? Mycoplasma Real-time qPCR Detection Kit 作為精確支原體檢測試劑,可用于確定細胞庫、病毒種子、臨床治療用途的細胞和生物制品中是否存在支原體污染。本試劑盒采用熒光探針qPCR法技術,定性檢測待測樣本中支原體DNA,可覆蓋100多種支原體DNA序列;具備高靈敏、高特異、安全高等,嚴格按EP2.6.7和JPXVII支原體檢測相關標準要求進行驗證。

        本試劑盒包含內部質控(IC),可用來判斷待檢樣本中是否包含對擴增反應存在抑制的因素,從而達到防止假陰性結果的產生;內部質控(IC)也可在樣本提取階段加入,以評估提取效果。本試劑盒與支原體DNA提取純化試劑盒配套使用,提取樣本中的支原體DNA,檢測限可達到10 CFU/mL,靈敏度可達1 CFU/mL。


        產品組分

        編號

        組分

        產品編號/規格

        40618ES05 (5T)

        40618ES25 (25 T)

        40618ES60 (100 T)

        40618-A

        4×MyqPCR Reaction Buffer

        50 μL

        250 μL

        1 mL

        40618-B

        MyPrimer&Probe MIX

        5 μL

        25 μL

        100 μL

        40618-C

        內部質控(IC)

        5μL

        25 μL

        100 μL

        40618-D

        陽性質控(PC)

        100 μL

        500 μL

        2 mL

        【注】陽性質控(PC)濃度為1000copies/μL。


        運輸儲存方法

        干冰運輸。-20℃保存,有效期一年。


        注意事項

        1)使用本試劑前請仔細閱讀本說明書,實驗應規范操作,包括樣本處理、反應的配制及加樣。

        2)加樣和配液步驟都盡量在冰上操作。

        3)每個組分在使用前都應震蕩混勻,低速離心。

        4)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

        5)本產品僅作科研用途。


        適用機型


        PRISM? 7500Real-Time PCR System、QuantStudio? 5ABI);CFX96(Bio-Rad)


        實驗設計

        一、待測樣本DNA提取

        建議使用QIAGEN公司的QIAamp DNA Mini Kit提取樣本DNA。

        、qPCR反應TX的準備

        1)根據所要檢測樣本的數量,計算所需反應孔數,一般做2個重復孔。

        反應孔數=(1個陽性質控PC+1個無模板對照NTC+N個待測樣本)×2

        2)根據表1反應TX,將所需試劑放冰上融化。

        3)根據反應孔數計算所需要的qPCR Mix的量。

        Mix=(反應孔數+2)*(10+1+1+8)(包含加樣損失)

        1. 反應TX(以40 μL為例)

        組分

        單孔體積(μL)

        終濃度

        4× MyqPCR Reaction Buffer (40618-A)

        10

         1×

        待測樣本DNA/陽性質控

        20


        MyPrimer&Probe MIX (40618-B)

        1

        0.4 μM

        IC (40618-C)

        1


        超純水

        8


        Total

        40


        【注】

        1)為保證實驗的穩定性,40618-A、40618-B組分需儲存于-20℃。

        2)為減少反復凍融次數和避免污染,建議初次使用時將40618-C、40618-D分裝儲存于-80℃。

        3qPCR Mix配制過程不加待測樣本DNA與陽性質控。

        、加樣

        1)充分震蕩混勻qPCR Mix,低速離心,將管蓋殘留液體收集至管底。

        2)向每孔反應管中分裝20μL qPCR Mix。

        3)向已分裝過qPCR Mix的反應管中加入樣品,示例如下:

        2. 加樣示例

        待測樣本DNA

        20 μL qPCR Mix+20 μL 待測樣本DNA

        NTC對照

        20 μL qPCR Mix+20 μL DNA Elution Buffer (或者ddH2O)

        陽性質控(PC)

        20 μL qPCR Mix +20 μL 陽性質控

        【注】:此時每個反應孔的體積為40μL

        4)蓋上反應管蓋子或者貼上光學膜,為避免影響熒光信號讀取,請注意不要在管蓋或者膜上做標記,或者用刮板反復摩擦。

        5)反應管短時低速離心,將管壁液體收集至管底;充分震蕩混勻后,再短時低速離心,將管蓋和管壁的殘留液體收集至底,如有氣泡,需將氣泡排盡。

        qPCR程序參數設置

        1、創建目的通道探針

        創建目的通道的FAM探針,選擇報告熒光基團為FAM,猝滅熒光基團為none;

        創建IC 通道的VIC探針,選擇報告熒光基團為VIC,猝滅熒光基團為none;

        選擇檢測參比熒光為ROX(可選擇,試劑盒中不含)。

        2、標準擴增程序:


        反應階段

        溫度

        時間

        循環數

        1

        預變性

        95℃

        5 min

        1

        2

        擴增反應

        95℃

        15 sec

        45

        62℃*

        30 sec

        【注】* 熒光信號采集。


        結果分析

        1、PC、NTC結果判斷:

        質控樣本

        FAM 信號

        VIC 信號

        PC

        Ct<40 ,且有明顯的擴增曲線。

        Ct<40 ,且有明顯的擴增曲線。

        NTC

        Ct40 ,或無明顯的起峰

        Ct40 ,或無明顯的起峰

        2、待測樣本檢測結果判定:

        FAM 信號

        VIC 信號

        結果判斷

        Ct<40 ,且有明顯的擴增曲線

        Ct<40 ,且有明顯的擴增曲線

        陽性

        Ct40 ,或無明顯的起峰

        有抑制

        Ct40 ,或無明顯的起峰

        Ct<40 ,且有明顯的擴增曲線

        陰性

        Ct40 ,或無明顯的起峰

        有抑制

        【注】*VIC信號如果有抑制,需重測或對樣本進行合適處理消除抑制因子

         

         

        HB210901




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